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活細胞動態(tài)信號網絡的新型成像研究,Ausbian血清助力細胞生物學研究

更新時間:2023-12-15  |  點擊率:317

細胞培養(yǎng)是研究細胞生物學的基礎,胎牛血清作為重要的細胞培養(yǎng)試劑,在細胞培養(yǎng)過程中發(fā)揮著重要作用。Ausbian進口特級胎牛血清,內毒素含量低,適合各類細胞生長繁殖。

 

綠色熒光蛋白(GFP)是一種常用的用于觀察細胞內部的具體活動蛋白,將GFP序列搭載在能結合目標分子的基因序列后,就能形成用于指示目標存在狀態(tài)的報告基因。在細胞內部中,報告基因與目的基因相連后,就能通過綠色熒光來顯示目標產物的信號。

 

近日,科研人員開發(fā)了一種多路復用策略,該策略使用自組裝肽在活細胞中隨機但穩(wěn)定的點聚集現有的遺傳編碼動態(tài)熒光報告,這種空間復用成像(SMI)策略可以測量存在于每個集群位置的蜂窩信號,具有比頻譜復用更大的復用容量。

 

然而,考慮到其報告身份編碼的空間性質,SMI不能用于可視化活細胞或細胞器中蛋白質的組織,也不能可視化響應刺激的蛋白質運動。SMI也不能容易地測量由存在的蛋白質量所指示的變化,如細胞基因表達或局部蛋白質翻譯。然而,利用空間作為一種資源來促進smi成像——這是其他成像發(fā)展(如擴展顯微鏡)中使用的主題——提出了一個問題,即是否可以利用其他非常規(guī)資源(如時間)來增加活細胞中同時可觀察到的信號數量。

 

科研人員在此次研究中,通過使用具有不同時鐘特性的熒光團,來指示不同的細胞信號,一個簡短的視頻(在幾秒鐘的時間內拍攝)記錄了每個像素處熒光的時間信息,可以使用標準解混線性代數進行反轉,以產生該像素處的單個信號幅度。每個像素處的信號幅度僅僅是系數乘以每個熒光團的標準時間波動跡,當以加權形式求和時,就構成了在該像素處獲得的記錄跡。

 

科研人員在這里使用具有不同關閉速率的可逆光開關FPs (rrsfp)來實現時鐘效果,盡管原則上任何時間波動的信號都可能適用于這一概念。研究表明,暫時復用成像(TMI)可以支持更多的信號一次成像比傳統(tǒng)的光譜復用可行的傳統(tǒng)顯微鏡上使用遺傳編碼試劑,揭示細胞周期蛋白之間的關系,以及不同的激酶活性之間的關系。TMI不需要任何硬件,除了標準的熒光顯微鏡,通常提供給生物學家,并使用遺傳編碼熒光報告,適合標準的生物學工作流程。


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